我国原发性肝癌（肝癌）疾病负担严重，预后不理想。通过简便的方法对肝癌高危人群进行早期筛查，是实现早期诊断和早期治疗，提高肝癌生存率的关键1。

临床常用的传统血液标志物1

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甲胎蛋白（AFP）

AFP是一种蛋白相对分子质量为70×103 的糖蛋白，1964年首次在肝细胞癌（HCC）患者的血清中被发现，目前仍然是 HCC 的常用诊断生物标志。高AFP已被证明与 HCC 的发生和进展相关，并被用作诊断和预后的指标。尽管如此，作为筛查标志物，AFP仍存在诸多问题。例如，良性肝脏疾病及一些其他癌症中也会存在AFP的升高；此外，即使是在 HCC 患者中大约只有 60%-80% 患者 AFP 水平升高。这些原因导致了 AFP 的高漏诊率。单独的 AFP 检测在早期 HCC 的诊断中所起到的作用有限。

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血清甲胎蛋白异质体（AFP-L3）

不同的AFP含有不同的糖基，其中AFP-L3显示出具有与凝集素结合的能力，在HCC患者中较AFP更具特异度。有研究发现，AFP-L3诊断 HCC 的灵敏度为18.8%，特异度为 99.4%，由于它的灵敏度不够高，因此在早期筛查中可能应用有限。

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脱-γ-羧基凝血酶原异常凝血酶原（PIVKA-II）

凝血酶原是在肝脏中合成的凝血蛋白，在肝脏疾病，包括 HCC 患者中，依赖维生素 K 的 γ -羧化受损，凝血酶原合成减少从而形成 des-γ-羧化凝血酶原。1984 年，Liebman 等用放射免疫法检测了HCC患者血清PIVKA-II 水平，发现 91% 的患者PIVKA-II水平显著升高。在中国国家卫生健康委员会发布的《肝细胞癌诊断与治疗标准化（2011 版）》中 PIVKA - II 已被纳入HCC辅助诊断标志物。

《血液标志物用于临床肝细胞癌早期筛查的专家共识》指出，（1）对于 HCC 危险人群，建议AFP作为HCC早期筛查的常规血液标志物，并需结合腹部超声检查；检测频率根据目标人群风险分层决定：非高危人群1年1次，高危人群6个月1次，极高危人群 3 个月 1 次；如果AFP阳性（持续≥400ng/ml），且排除慢性或活动性肝炎、肝硬化、睾丸或卵巢胚胎源性肿瘤以及妊娠等，建议应用动态增强CT/MRI 进行临床诊断。（2）对于AFP滴度升高者或不升高者，可联合检测AFP-L3和 DCP提高早期HCC检出率（参考临界值：AFP≥200 ng/ml，AFP-L3≥15%，DCP≥40 mAU/ml）。

新型血液标志物

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甲基化 DNA

DNA 甲基化是指在 DNA 甲基转移酶的作用下，在基因组 CpG 二核苷酸的胞嘧啶5，碳位上共价键结合一个甲基基团。DNA 甲基化、非编码 DNA 和组蛋白乙酰化被普遍认为是影响基因表达的主要的表观遗传修饰。其中，DNA甲基化参与基因的转录调控，维持基因组的稳定性，也是最早发现的 DNA 修饰途径之一。近年来，几项利用全基因组技术检测癌症 DNA 甲基化的研究表明，在癌症中有大量基因表现出异常的 DNA 甲基化谱。在HCC发生过程中，DNA甲基化是一个早期事件，包括肿瘤抑制基因甲基化水平升高或者原癌基因甲基化降低，且该变化早于驱动基因的突变。

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循环细胞游离DNA（cfDNA）

cfDNA是血液中一种由细胞释放的DNA片段，目前许多实验认为cfDNA中包含针对特异肿瘤的相关基因特征，因此，通过检测cfDNA有可能进一步提高早期HCC诊断的灵敏度及特异度。循环肿瘤 DNA（ctDNA）是肿瘤细胞更新、坏死、凋亡过程中向细胞外分泌释放并进入外周血的特异性肿瘤相关 DNA 片段，能够反应肿瘤细胞遗传学和表观遗传学信息。

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微小RNA（miRNA）

miRNA 是一种长度为22-24个核苷酸的非编码小RNA，它们调控转录后基因表达，以往文献报道，血清 miRNA 主要存在于磷脂膜形成的外泌体中，从而避免了循环中RNase的降解。因此能在血液或组织中特异、稳定地检测到，这使其成为较为理想的潜在肿瘤标志物。

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长链非编码RNA（lncRNAs）

是指长度超过200个核苷酸的RNA，虽然它不编码蛋白质，但与多种功能有关，包括顺式或反式转录的调控、信使 RNA 处理的调节、翻译后对蛋白质活性的控制等。有研究发现，lncRNA家族成员LINC00853在HCC患者中显著表达，在早期HCC中，只有9%的早期HCC病例AFP阳性，而linc00853阳性的病例占 94%。此外，即使在AFP阴性的早期HCC病例中，LINC00853也呈高阳性，表明 LINC00853 可能在 AFP 阴性肿瘤患者中具有特殊的价值。

肿瘤来源生物标志物

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PD-L1

PD-1和PD-L1属于免疫检查点蛋白家族。PD-1主要表达于各种免疫细胞，PD-L1在多种正常和免疫细胞上表达，如树突状细胞、活化的T淋巴细胞和B淋巴细胞以及巨噬细胞等。它们的相互作用在调节免疫系统中起着“刹车”作用，以减少过度炎症和自身免疫反应。然而，肿瘤细胞也能通过在肿瘤细胞表面表达PD-L1来实现免疫2。

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肿瘤突变负荷（TMB）

是指单个肿瘤基因组中发现的非同义突变的数量，包括DNA损伤反应基因和编码DNA聚合酶ε（POLE）和δ（POLD）催化亚单位的基因改变，并已评估其作为多种肿瘤类型的生物标记物的潜力。然而，TMB测定缺乏标准化阈值，量化方法也存在差异3。

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肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）

指浸润于肿瘤组织中发挥抗肿瘤作用的淋巴细胞,是肿瘤免疫微环境中最常见和最重要的组成部分。有研究表明在实体瘤中TIL浸润程度增加与PD-L1表达上调及临床获益相关。TIL直接影响免疫微环境,不同TIL在HCC中的变化与作用是未来其作为免疫生物标志物的重要探索方向2。

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DNA错配修复(MMR)/微卫星不稳定(MSI)

MMR基因经转录翻译后表达相应的错配修复蛋白，常见的MMR蛋白包括MutL homolog 1 (MLH1)、MutS protein homolog 2 (MSH2)、MutS homolog 6 (MSH6)和 PMS1 homolog 2 (PMS2)，其中任一MMR蛋白的缺失可造成细胞的错配修复功能缺陷，导致DNA复制过程中碱基错配累积，从而引起MSI的发生，增加肿瘤发生风险2。

除了上述生物标志物以外，环状 RNA、糖组学、肠道微生物、肿瘤异质性指标等也正在研究中1,2,3。未来的研究需要进一步验证这些生物标志物的可靠性和普适性，以开发更高效、准确的诊断工具。

参考文献：

1. 中华预防医学会感染性疾病防控分会. 血液标志物用于临床肝细胞癌早期筛查的专家共识. 中国病毒病杂志，2021,11(5):334-339.

2. 黄孙桦,刘建东,黄罡.肝细胞癌免疫治疗生物标志物的研究进展 .肝脏,2023,28(05):510-512.

3. He Y, Lu M, Che J, et al. Biomarkers and Future Perspectives for Hepatocellular Carcinoma Immunotherapy.Front Oncol. 2021 Sep 6;11:716844.

来源：医脉通肝脏科